BCRET実習講習「アデノ随伴ウイルス（AAV）を用いた遺伝子治療用製品の製造工程の開発（培養＆精製）」

アデノ随伴ウイルス（AAV）を用いた遺伝子治療用製品の製造工程の流れを実習で体験する。培養（アップストリーム）工程として、浮遊細胞（HEK293）の播種、AAVの発現に用いる３種類のプラスミドを用いたトリプルトランスフェクションを行い、培養上清及び細胞からAAVを回収する（30％）。さらに精製（ダウンストリーム）工程として、抗AAVのVHH抗体を用いたアフィニティーおよびAEXを用いた二段階の精製を行い、分析用サイズ排除カラムによる凝集物の有無の確認、SDS-PAGEによる精製サンプル中の目的タンパク質及び不純物の確認及びdroplet digital PCRを用いたAAVの力価測定までの一連の工程における操作を実践することで、製造の手順と留意点などを習得する（40%）。また実習と並行して、遺伝子治療とAAVについて、AAVの基礎、製造または規制等に関して、教材を用いて解説する（30%）。